二冲程机油和四冲程机油的区别在于机油配方不同，机油润滑的方式不同，气缸盖结构不同。
1、机油配方不同：二冲程发动机和四冲程发动机的润滑方式和结构不同，所以机油的配方也不同。二冲程机油与汽油预混性较好，四冲程机油低温启动保护性能较好。
2、机油润滑的方式不同：二冲程机油是与汽油按照一定的比例进行混合的，在使用的过程中会随汽油一起燃烧。四冲程机油可以起到润滑、散热和清洁的作用，这种类型的机油是不参与燃烧的。所以对于四冲程的发动机来讲，几乎是没有积碳的。
3、气缸盖结构不同：二冲程机油的气缸盖结构比较简单，只是一个简单的盖子，即使有气门也只有一个排气门。在混合燃料里使用油最重要的是混合用还是分离用油。混合用油会含有分散剂及清净剂在里面，而分离用则是没有。分离用的有加入防酸化剂，但是混合用的并没有加。
4、机油，即发动机润滑油，能对发动机起到润滑减磨、辅助冷却降温、密封防漏、防锈防蚀、减震缓冲等作用。被誉为汽车的“血液”。机油由基础油和添加剂两部分组成。基础油是润滑油的主要成分，决定着润滑油的基本性质，添加剂则可弥补和改善基础油性能方面。
二冲程摩托车的机油不能用汽油机油、柴油机油和四冲程摩托车的机油代替，这是由于二冲程摩托车发动机的燃烧和润滑特性决定的。二冲程摩托车发动机的工作原理和四冲程发动机不同，它们的机油润滑方式和对机油的要求也不一样。二冲程摩托车发动机对机油的要求是容易与汽油混合气混合和挥发燃烧，而四冲程机油正好相反，二冲程摩托车发动机使用四冲程机油，会增加发动机燃烧室相关部件的积碳，有可能会影响发动机正常性能，也会增驾发生故障的几率，所以二冲程摩托车发动机最好是使用二冲程专用的机油才好。
四冲程摩托车发动机的润滑，是由发动机里面的机油，反复循环来造成的，它对机油在这方面的要求与汽油发动机和柴油发动机，以及汽车等的发动机是基本上一样的，只是对机油耐高温和高速搅拌能力的要求更高，和离合器对机油的要求略有不同而已。但二冲程摩托车发动机的润滑方式却不一样，它的曲轴连杆、缸体活塞和活塞环等是用混合在汽油里的机油，或者是由专门的机油泵供油再与化油器的混合气混合，然后进入曲轴箱和气缸燃烧室，参与燃烧并同时对曲轴连杆、曲轴轴承、缸体、活塞、活塞环、活塞销等部件进行润滑，然后再随排气排出去，所以二冲程摩托车的排气管是要冒蓝烟的。
如果用四冲程发动机用的汽油机油、柴油机油或者是四冲程的摩托车机油，这些机油由于不易与汽油混合气混合和燃烧挥发排出，所以会更容易产生积碳，残留在曲轴轴承、活塞顶部、缸盖、火花塞、排气口和排气管等处，这些积碳多了就有可能会影响发动机的性能，甚至还有可能会引发一些故障，还有可能会造成排气口和排气管的堵塞，造成发动机动力下降等情况。所以二冲程摩托车燃烧用的机油，最好是用二冲程专用的，至于变速箱润滑用的机油就没事了，用四冲程摩托车的机油也可以，二冲程摩托车润滑变速部分和润滑发动机部分的机油是分开的。
